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Chemically Defined Media (Fibroblast Hybridoma Myeloma)

 正常ヒト線維芽細胞

 ハイブリドーマ&ミエローマ


ハイブリドーマ&ミエローマ(モノクローナル抗体生産)
HY350培地 (CD medium), 液体 or 粉末
For hybridomas and myelomas

ハイブリドーマ|ミエローマ|完全合成培地|無血清培地


ハイブリドーマの安定的な継代培養試験

Fig. 1)Subculture of rat hybridomas in HY350 medium with L-glutamine by direct adaptation protocol.

 
 血清培地(IMDM with 10% FBS)で継代培養したハイブリドーマ BF11細胞を、HY350培地(20 mL with 4 mM Gln)を加えた100 mm ディスポーザブルディシュ(20 mL)に播種して、以下の条件で、60日間静置培養した。継代は、3日間ごとに新しい培地に細胞を播種して行った。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:0.5 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

ミエローマの安定的な継代培養試験

Fig. 2)Subculture of mouse myelomas in HY350 medium with L-glutamine.

 
 血清培地(IMDM with 10% FBS)で継代培養したミエローマ NS0細胞を、HY350での低血清条件(1% → 0.2%のシークエンシャルアダプテーション)で順応させた後、HY350培地(20 mL with 4 mM Gln)を加えた100 mm ディスポーザブルディシュ(20 mL)に播種して、以下の条件で、60日間静置培養した。継代は、3日間ごとに新しい培地に細胞を播種して行った。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:0.5 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%   (4) コレステロール溶液の添加:SyntheChol NS0 Supplement (Sigma社) = 1/2,500 希釈

無血清培地(当社)にアダプトしたハイブリドーマの細胞増殖試験(他社製品比較)

Fig. 3)Growth rate of mouse hybridomas in HY350 medium or commercial media.

 
 無血清培地(当社;HY300)で100日間 継代培養したマウス由来ハイブリドーマ(9E10細胞)を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)、市販培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコ(6 mL)に播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

Fig. 4)Growth rate of rat hybridomas in HY350 medium or commercial media.

 
 無血清培地(当社;HY300)で100日間 継代培養したラット由来ハイブリドーマ(BF11細胞)を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)、市販培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコ(6 mL)に播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

無血清培地(当社)にアダプトしたハイブリドーマの細胞増殖試験

Fig. 5)Growth rate of mouse hybridomas adaptated with HY300 medium.

 
 無血清培地(当社;HY300)で60日間継代培養したハイブリドーマ 9E10細胞を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

Fig. 6)Growth rate of rat hybridomas adaptated with HY300 medium.

 
 無血清培地(当社;HY300)で60日間継代培養したハイブリドーマ BF11細胞を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

ハイブリドーマの細胞増殖試験

Fig. 7)Growth rate of mouse hybridomas in HY350 medium with L-glutamine.

 
 血清培地(IMDM with 10% FBS)で継代培養したハイブリドーマ 9E10細胞を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

Fig. 8)Growth rate of rat hybridomas in HY350 medium with L-glutamine.

 
 血清培地(IMDM with 10% FBS)で継代培養したハイブリドーマ BF11細胞を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%

ミエローマの細胞増殖試験

Fig. 9)Growth rate of mouse myelomas adaptated with HY350 medium.

 
 無血清培地(当社;HY350)で継代培養したミエローマ NS0細胞を、HY350培地(5 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコに播種、または、血清培地(IMDM +10% FBS)で継代培養したNS0細胞を、血清培地(IMDM +10% FBS)(5 mL)を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%   (4) コレステロール溶液の添加:SyntheChol NS0 Supplement (Sigma社) = 1/2,500 希釈

無血清培地(当社)にアダプトしたミエローマの静置培養とシェーカー培養

Fig. 10)Growth rate of mouse myelomas adaptated with HY200 medium.

 
 無血清培地(当社;HY200)で60日間継代培養したミエローマ NS0細胞を、HY350培地(35 mL with 4 mM Gln)を加えた125 mL ディスポーザブル三角フラスコに播種、または、血清培地(IMDM +10% FBS)で継代培養したNS0細胞を、血清培地(IMDM +10% FBS)(35 mL)を加えた125 mLディスポーザブル三角フラスコに播種して、以下の条件でシェーカー培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) シェーカー回転数:125 rpm培養   (3) 温度:37℃   (4) 炭酸ガス濃度:5%   (5) コレステロール溶液の添加:SyntheChol NS0 Supplement (Sigma社) = 1/2,500 希釈

Fig. 11)Growth rate of mouse myelomas adaptated with HY200 medium.

 
 無血清培地(当社;HY200)で60日間継代培養したミエローマ NS0細胞を、HY350培地(6 mL with 4 mM Gln)を加えたT25フラスコに播種、または、血清培地(IMDM +10% FBS)で継代培養したNS0細胞を、血清培地(IMDM +10% FBS)(6 mL)を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
< Conditions >
(1) 播種細胞密度:2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度:37℃   (3) 炭酸ガス濃度:5%   (4) コレステロール溶液の添加:SyntheChol NS0 Supplement (Sigma社) = 1/2,500 希釈


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