Fig. 1）Subculture of rat hybridomas in HY350 medium with L-glutamine by direct adaptation protocol.

 
　血清培地（IMDM with 10% FBS）で継代培養したハイブリドーマ BF11細胞を、HY350培地（20 mL with 4 mM Gln）を加えた100 mm ディスポーザブルディシュ（20 mL）に播種して、以下の条件で、60日間静置培養した。継代は、3日間ごとに新しい培地に細胞を播種して行った。
＜ Conditions ＞
(1) 播種細胞密度：0.5 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度：37℃   (3) 炭酸ガス濃度：5%

Fig. 2）Subculture of mouse myelomas in HY350 medium with L-glutamine.

 
　血清培地（IMDM with 10% FBS）で継代培養したミエローマ NS0細胞を、HY350での低血清条件（1% → 0.2%のシークエンシャルアダプテーション）で順応させた後、HY350培地（20 mL with 4 mM Gln）を加えた100 mm ディスポーザブルディシュ（20 mL）に播種して、以下の条件で、60日間静置培養した。継代は、3日間ごとに新しい培地に細胞を播種して行った。
＜ Conditions ＞
(1) 播種細胞密度：0.5 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度：37℃   (3) 炭酸ガス濃度：5%   (4) コレステロール溶液の添加：SyntheChol NS0 Supplement (Sigma社) = 1/2,500 希釈

Fig. 3）Growth rate of mouse hybridomas in HY350 medium or commercial media.

 
　無血清培地（当社；HY300）で100日間 継代培養したマウス由来ハイブリドーマ（9E10細胞）を、HY350培地（5 mL with 4 mM Gln）、市販培地（5 mL with 4 mM Gln）を加えたT25フラスコ（6 mL）に播種して、以下の条件で静置培養した。
＜ Conditions ＞
(1) 播種細胞密度：2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度：37℃   (3) 炭酸ガス濃度：5%

Fig. 5）Growth rate of mouse hybridomas adaptated with HY300 medium.

 
　無血清培地（当社；HY300）で60日間継代培養したハイブリドーマ 9E10細胞を、HY350培地（5 mL with 4 mM Gln）を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
＜ Conditions ＞
(1) 播種細胞密度：2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度：37℃   (3) 炭酸ガス濃度：5%

Fig. 7）Growth rate of mouse hybridomas in HY350 medium with L-glutamine.

 
　血清培地（IMDM with 10% FBS）で継代培養したハイブリドーマ 9E10細胞を、HY350培地（5 mL with 4 mM Gln）を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
＜ Conditions ＞
(1) 播種細胞密度：2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度：37℃   (3) 炭酸ガス濃度：5%

Fig. 9）Growth rate of mouse myelomas adaptated with HY350 medium.

 
　無血清培地（当社；HY350）で継代培養したミエローマ NS0細胞を、HY350培地（5 mL with 4 mM Gln）を加えたT25フラスコに播種、または、血清培地（IMDM +10% FBS）で継代培養したNS0細胞を、血清培地（IMDM +10% FBS）（5 mL）を加えたT25フラスコに播種して、以下の条件で静置培養した。
＜ Conditions ＞
(1) 播種細胞密度：2.0 x 10e5 cells/mL   (2) 培養温度：37℃   (3) 炭酸ガス濃度：5%   (4) コレステロール溶液の添加：SyntheChol NS0 Supplement (Sigma社) = 1/2,500 希釈

Fig. 10）Growth rate of mouse myelomas adaptated with HY200 medium.