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293 Chemically Defined Media

① 接着培養
 
② クローニング試験
③ 浮遊培養
*L-アラニル-L-グルタミンを含む Ready-to-use製品
④ フェドバッチ培養

シングルセルクローニング試験
HE150培地 (CD medium), 液体
For 293 cells "Expi293F, 293-F, 293T, HEK293, etc."

293 cells|Single cell cloning assay|Chemically defined & Serum-free medium

 HE150培地はヒト由来 293細胞(例;Expi293F細胞、293-F細胞、293T細胞、HEK293細胞等)のシングルセルクローニングのためにデザインされた、化学的に成分が明らかな完全合成培地(無血清培地)です。HE150培地にはフェノールレッドを含みます。また、タンパク質や加水分解物、動物成分、植物成分、高分子を含まず、ロット間の均一性を高めた培地です。
 一般的な無血清培地は、シングルセルクローニング試験への適応が困難であると言われています。無血清培養において、多種多様な単クローン性の293細胞を得るためには、シングルセルで増殖する過程において、適切な栄養環境を整えて生存率と増殖率を高めた培地の開発が必要でした。HE150培地は、293細胞に対して、シングルセルでの増殖を可能にして、コロニー形成効率を飛躍的に向上させた、シングルセルクローニング試験用の完全合成培地です。

Protocol
品質保証データ(COA)
(1)単クローン性の細胞集団を特定・分離・獲得できます。
(2)これまで困難であった完全合成培地を使用したクローニング試験が可能です。
(3) 毒劇物・排出等の法規制に適用外です。

Figure 1)Single cell cloning assay of 293 cells using HE150 medium.

HE150培地を用いて、96-wellプレートで、以下の条件で培養しました。
HE150培地は、Expi293F細胞、293-F細胞に対して、シングルセルから増殖させて、クローン細胞を獲得できる培地です。
< Culture conditions >
(1) Seeding cell density:1 cell/well.
(2) Static culture:37℃, 5% CO2.
(3) Culture volume:200 μL with L-alanyl-L-glutamine.


Figure 2) Growth assay of Expi293F cells cloned by HE150 medium.

HE150培地のクローニング試験によってクローン化された Expi293F細胞に対して、 HE400AZ培地を用いて、細胞増殖試験を行いました。
HE150培地によって得られたクローン細胞は、クローニング前の細胞と比較して、より高い細胞増殖能を発揮することができました
< Culture conditions >
(1) Seeding cell density:3 x 10e5 cells/mL.
(2) Shaker culture:125 rpm, 37℃, 8% CO2.
(3) Culture volume:30 mL with L-alanyl-L-glutamine.

Figure 3)Single cell cloning assay of 293 cells using HE150 medium.

HE150培地を用いて、96-well plateで、以下の条件で培養しました。
HE150培地は、293T細胞、HEK293細胞に対して、シングルセルから増殖させて、クローン細胞を獲得できる培地です。
*293T細胞およびHEK293細胞は、HE400AZ培地にアダプテーションさせて浮遊化した細胞を使用しました。
< Culture conditions >
(1) Seeding cell density:1 cell/well.
(2) Static culture:37℃, 5% CO2.
(3) Culture volume:200 μL with L-alanyl-L-glutamine.


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